Анализ ифа: что значат результаты теста на антитела к коронавирусу

Анализы при иммунологическом анализе крови методом ИФА

О том, какие бывают анализы крови с точки зрения иммунологической системы человека, мало кто знает, так эти анализы не так распространены. Как правило, такое исследование крови дает информацию о вирусе иммунодефицита в организме человека и является анонимной, так как проводится по желанию пациента.

В основном, для проведения ИФА анализа, исследуемым биологическим материалом является кровь, однако, исследованию может подвергаться спинномозговая жидкость, содержимое стекловидного тела, околоплодные воды и др.

Для забора используют взятую натощак из вены кровь, из которой для исследования методом центрифугирования получают сыворотку. Кроме этого, изучение сыворотки крови способно выявить ряд венерических заболеваний (сифилис, герпес, хламидиоз), а также все виды гепатита, корь, краснуху, паротит и токсоплазмоз.

В основном, для проведения ИФА анализа, исследуемым биологическим материалом является кровь, однако, исследованию может подвергаться спинномозговая жидкость, содержимое стекловидного тела, околоплодные воды и др.

Иммуноглобулины — это иммунные молекулы, способные связываться и нейтрализовать большинство инфекционных возбудителей и токсинов в организме. При этом важнейшей характеристикой иммуноглобулинов является их специфичность, то есть способность связываться с определенным антигеном. Именно это свойство используется для проведения анализа крови на иммуноглобулин.

Существует пять типов иммуноглобулинов, однако наиболее изученными являются иммуноглобулины А, М, и G. Иммуноглобулины М и G проявляют свою активность в крови. Иммуноглобулины А являются, своего рода, барьером на поверхности слизистых оболочек, так как присутствуют там в большом количестве.

Иммунологический анализ крови позволяет определять тип иммуноглобулинов, благодаря этому ИФА позволяет не только диагностировать заболевание, но и определить стадию данного и отслеживать динамику заболевания:

• в первые 2 недели заболевания обнаруживаются только иммуноглобулины А;
• со 2-й по 3-ю неделю заболевания в крови обнаруживаются иммуноглобулины А и М.;
• Сс3 по 4 неделю анализ крови на иммуноглобулин  определяются все три типа;
• при выздоровлении в крови пропадают иммуноглобулины М, а количество А и G снижается в 2 – 4 раза;
• при наличии хронического процесса в крови обязательно присутствуют иммуноглобулины G, иммуноглобулины М отсутствуют, иммуноглобулины А могут как присутствовать, так и отсутствовать.

Иммуноферментный анализ сыворотки крови

Сыворотка крови – это прозрачная жидкость с желтым оттенком. После свертывания крови она отделяется от кровяного сгустка. Не содержит фибрина и форменных элементов.

Иммуноферментный анализ сыворотки крови основан на взаимодействии антигена с антителом, причем один из них содержит в своей структуре фермент. При взаимодействии двух компонентов содержимое пробирки должно менять свой цвет. Результаты сравниваются со стандартной цветовой шкалой, и далее устанавливается антиген, который присутствует в материале. Другими словами принцип иммуноферментного анализа сыворотки крови можно объяснить так:

1. подготавливаются наборы антигенов (например, возбудители инфекционных заболеваний, аллергены или гормоны);
2. пациент сдает кровь на анализ, из которой в лаборатории выделяется сыворотка;
3. материал для исследования добавляется в лунки готовых наборов, после чего возникает реакция антиген-антитело;
4. оставшаяся сыворотка крови убирается, а обнаруженные антитела распознаются при помощи индикаторов.

Иммуноферментный анализ сыворотки крови считается достоверным. Но в тех случаях, когда произошло неправильное взятие крови для анализа, или была нарушена техника проведения исследования, или же имеются у человека скрытые системные заболевания, результаты иммуноферментного анализа сыворотки крови могут оказаться ложными.

Иммуноферментный анализ сыворотки крови исследует практически все гормоны щитовидной железы, онкомаркеры и различные виды инфекций.

К гормонам щитовидной железы относятся тиреоглобулин (ТГ), тироксин (Т4), трийодтиронин (Т3), свободный тироксин (Т4), свободный трийодтиронин (Т3).

Нормы

Иммуноферментный анализ крови в норме считается, если присущи такие допустимые нормы гормонов щитовидной железы:

• тиреоглобулин (ТГ) – допустимые границы 70 МЕ/мл;
• тироксин (Т4) – 64-146 нмоль/л (50-113 нг/мл);
• трийодтиронин (Т3) – 1,8-2,8 нмоль/л (0,8-2,0 нг/мл);
• свободный тироксин (Т4) – 11-25 пмоль/л (10-27 пг/мл);
• свободный трийодтиронин (Т3) – 4,49-9,3 пмоль/л (2,5-5,8 пг/мл).

В случае исследования половых гормонов иммуноферментный анализ крови в нормедля женщин считается, если в организме выделяется лютеинизирующий гормон (ЛГ) в таких пределах:

• фолликулярная фаза цикла (с первого дня месячных до двенадцатого-четырнадцатого) – 2-14 мЕд/л;
• овуляционная фаза цикла (с двенадцатого дня по четырнадцатый день) – 24-150 мЕд/л;
• лютеиновая фаза цикла (с пятнадцатого-шестнадцатого дня и до начала следующих месячных) – 2-17 мЕд/л.

В норме для мужчин принимается, если половой гормон вырабатывается в пределах 0,5-10 мЕд/л.

При исследовании хронического гонадотропина (ХГ) референсные значения зависят от пола человека.

• У взрослых мужчин и небеременных женщин нормой считается уровень ХГ ниже 5мЕд/мл.
• У беременных женщин результат зависит от срока беременности и может колебаться в пределах 25-49000 мЕд/мл.

Иммуноферментный анализ крови исследует множество онкологических показателей. К ним можно отнести наличие пролактина, эстрадиола, прогестерона, тестостерона, стероид связывающего глобулина (ССГ) и других маркеров. Но интерпретация результата анализа и норм этих показателей должна проводиться только лечащим врачом.

Кроме того, данный метод диагностирует инфекционные (например, краснуха, корь, туберкулез, герпес, сифилис, гепатит, псевдотуберкулез) и аутоиммунные заболевания разного вида, а также устанавливает иммунный статус человека. Но все показатели и полученные результаты должны расшифровываться квалифицированным специалистом.

Какие бывают иммуноглобулины

Открыто и изучено 5 основных классов иммуноглобулинов – IgА, IgM, IgG, IgD, IgE.  роль остальных еще до конца не выяснена и она находятся в стадии научного исследования.

Обратите внимание: наиболее важное в практической медицине значение имеют иммуноглобулины классов – А, М и G. Информативность определения основана на разных временных промежутках их появления, максимума и исчезновения

Рассмотрим этот вопрос более детально.

Основная задача иммуноглобулина А (IgA) заключается в защитных функциях слизистых оболочек дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта и мочевыделительной системы. При остром начале заболевания выявить их невозможно. Появляются эти защитные комплексы лишь со 2 недели начала заболевания, иногда позже. Основная масса иммуноглобулина А сосредоточена в слизистых тканях. Ориентировочно около 80%. Остальные антитела циркулируют в крови. Основная функция – обезвреживание и уничтожение микроорганизмов. После стихания острых проявлений заболевания количество этих иммуноглобулинов начинает уменьшаться и полностью уходит на сроке до 8 недель после начала болезни. Если IgA обнаруживаются в более поздние сроки, то это свидетельствует о хронизации процесса.

Главными и первыми маркерами острой фазы развивающейся патологии являются иммуноглобулины класса М (IgM). Обнаруживаются они к 5 суткам начала недомогания. Определить их наличие в крови можно около 6 недель. Затем они начинают быстро исчезать.

Остаточный иммунный ответ характеризует наличие в крови иммуноглобулинов класса G (IgG). Появление этих факторов в крови обнаруживается примерно через месяц после начала болезни. В дальнейшем они могут определяться в течение многих месяцев, лет и даже всю жизнь, выполняя защитную функцию от возврата (рецидива) болезни, а в некоторых случаях делая невозможным  вторичное развитие патологии. Если же количество иммуноглобулина G начало вновь расти, то можно подозревать повторное заражение. Подобный вывод можно сделать путем проведения двух-трех проб, сделанных с промежутком в 2 недели.

Иммуноглобулин Е (IgE) используется в практике паразитологии.

Иммуноглобулин D (IgD) располагается на B-лимфоцитах, находится в небольшой концентрации у здоровых людей. После 10 года жизни достигает максимальных значений. Количество иммуноглобулина D увеличивается при беременности, у больных системными заболеваниями соединительной ткани, бронхиальной астмой, заболеваниями, вызванные иммунодефицитным состоянием.

Если ИФА на ВИЧ положительный что делать?

Получить результат можно либо положительный, либо отрицательный, промежуточных вариантов не существует. Нельзя забывать, что существует некоторый процент погрешности, и чем меньше срок, тем неточность выше.

ИФА на ВИЧ положительный – это не приговор и не окончательный ответ. Существует ряд причин, по которым ответ выходит ложноположительным.

• Затяжная болезнь вирусной природы;
• Беременность;
• Хроническое инфекционное заболевание.

Ослабленный иммунитет может привести к ошибкам при постановке диагноза, потому результаты нужно перепроверять.

ВИЧ ИФА положительный что это значит? Это значит, что требуется дополнительные исследования. Если контакт с вирусом иммунодефицита произошел недавно, и тест проводится в первый раз, то сильно волноваться не нужно. Потребуется или повторить тест через некоторое время, или попробовать другой метод определения ВИЧ. Более точные методики предполагают повышенную стоимость, но в борьбе за свою жизнь такие траты оправданы.

Анализ ИФА положительный ВИЧ не обязательно является диагнозом. Говорить о высокой точности анализа можно только на поздних сроках заболевания, к этому времени у больного, вероятно, уже проявятся очевидные внешние признаки заболевания. Поэтому исследовать организм всеми доступными способами и средствами нужно как можно раньше.

В качестве дополнительных анализов доктора назначают либо иммуноблоттинг, либо же тест на вирусную нагрузку. Это все в совокупности дает наиболее полное представление о состоянии здоровья и позволяет строить прогнозы относительно будущего обследуемого пациента.

Антиретровирусная терапия ВИЧ назначается только после теста на вирусную нагрузку. Поэтому в случае положительного ИФА теста на ВИЧ в любом случае придется проводить и другие исследования, чтобы определить не только факт болезни, но и концентрацию вируса в жидкостях организма. Не нужно также удивляться повтору анализа даже после постановки диагноза, потому что следить за жизнедеятельностью вирусной массы необходимо и в ходе терапии.

Отрицательный результат ИФА

Отрицательный результат ИФА правдив примерно на 98%, положительный нельзя с первого раза принимать на веру, приходится перепроверять, и желательно не однократно. Рекомендуется для максимально точного результата проводить одинаковые анализы в двух разных лабораториях, это исключает вероятность ошибки из-за человеческого фактора.

Немного цифр и статистики. По данным лечебных центров, в 99,5% случаев вирус легко обнаруживается в течение 6 месяцев после заражения. Нечасто случается, что на протяжении года не получается определить статус. Средняя вероятность ошибки при обследовании на ВИЧ 2%, точность зависит и от уровня лаборатории, и от состояния здоровья.

*Важно помнить, если анализ ИФА на ВИЧ все же выявил заболевание, не стоит огорчаться раньше времени. В настоящее время существует целый список антиретровирусных препаратов от ВИЧ, которые помогут в борьбе с болезнью и не дадут ей перейти в крайнюю форму — СПИД

Виды иммуноглобулинов

Иммуноглобулины человека дифференцируются на несколько классов, отличающихся друг от друга свойствами, структурой и антигенными особенностями тяжелых цепей (Н-цепи). У всех млекопитающих, в том числе и человека, выделяют пять Н-цепей, которые и определяют принадлежность иммуноглобулинов к соответствующему классу: G, М, A, D, Е.

Функции каждых иммуноглобулинов (lg) различны:

Возникновение иммуноглобулинов происходит по своеобразной «цепочке» — lgM lgG, именно так реагирует организм на появление в организме антигена. Во время лабораторной диагностики проводится оценка концентрации трех основных иммуноглобулинов – G, M, A.

Часто задаваемые вопросы

Может ли не быть антител, если переболел коронавирусом? Здесь нет и не может быть точного ответа, так как коронавирусная инфекция еще изучена недостаточно, и статистических данных мало, а те, что есть, порой противоречивы и непостоянны.

Алгоритм противостояния вирусам стандартный, основная роль в нем принадлежит антителам

Тем не менее, отсутствие антител после Covid-19 вполне допускается в силу нескольких причин, к которым относятся:

• ошибочный диагноз «коронавирус» изначально. Подобная ситуация не редкость;
• ошибка самого теста на антитела, который просто не сработал;
• низкий иммунный статус пациента, например, при СПИДе: человек справился с инфекцией, но слабый иммунитет не «запомнил» возбудителя и не выработал достаточно антител;
• иммунитет к Covid-19 сформировался, но только на время болезни. После победы над ней синтез защитных глобулинов прекратился за ненадобностью.

Что может повлиять на результат анализа? Исследование может показать отсутствие lgM при его наличии в период так называемого «серологического окна» – между 5-7 и 10-14 днем при вялотекущем заболевании. При этом тест ПЦР также даст отрицательный ответ, поскольку вирус еще не размножился до выявляемого уровня.

Бывает и наоборот, когда анализы показывают присутствие lgM, а на самом деле в крови Ковида нет. Такой результат возможен у пациентов, страдающих системной красной волчанкой, тиреоидитом и другими аутоиммунными патологиями, а также ВИЧ-инфекцией.

Где сдать анализ

Бесплатное ИФА-тестирование на наличие коронавирусов делают в государственных медицинских учреждениях и исключительно по направлению врача. Кровь сдают и в специализированной лаборатории, аккредитованной Роспотребнадзором, оборудованной современной аппаратурой, оснащенной качественными тест-системами. Цена теста на коронавирус зависит от его вида (качественного или количественного), загруженности клиники, стоимости используемых реактивов. Вызов сотрудников лаборатории на дом обойдется на порядок дороже.

Обследование пациентов на коронавирус методом ИФА проводят в лабораториях, аккредитованных Роспотребнадзором

Сделать тест получится после оформления заявки и оплаты на сайте частной лаборатории. Результаты можно будет узнать спустя несколько дней на сайте, по телефону или по электронной почте. Начиная с последней декады марта текущего года масштабное тестирование проводится в нескольких клиниках. Где сдать кровь для проверки методом иммуноферментного анализа:

• «Гемотест»;
• «Инвитро»;
• «Хеликс».

Этими лабораториями были сданы необходимые документы для получения лицензии на диагностирование коронавирусной инфекции. В частных медцентрах ИФА проводится платно, а направления от врача не требуется. Но провериться получится только при отсутствии симптомов опасной патологии инфекции — высокой температуры, кашля, боли в горле, затрудненного дыхания.

Для чего нужен ИФА-анализ

Тест на ИФА является наиболее информативным видом исследования, поскольку при его проведении максимально учитываются исходные данные пациента (общее состояние, динамика и стадия заболевания, эффективность проводимой терапии, др.), что является важным для составления верной схемы лечения.

Благодаря высокой информативности теста можно достаточно быстро вылечить практически любые серьезные заболевания, связанные с нарушениями иммунной системы.

Тест на иммуноферменты назначают для диагностирования болезней, передающихся при половых контактах, онкологических и инфекционных процессов, расстройств в работе репродуктивной и эндокринной системе, иммунодефицитных и аутоиммунных заболеваний, для определения аллергенов, а в некоторых случаях – для оценки риска развития некоторых патологий почек и сердечно-сосудистой системы.

При беременности ИФА-исследование назначается для выявления нарушений развития плода и контроля над ними. Проведение такого теста позволяет контролировать уровень в крови антител, которые способны спровоцировать у плода неврологические расстройства, могущие негативным образом повлиять на ход беременности.

Преимущества ИФА-теста:

• Высокий уровень точности полученных данных;
• Возможность диагностики патологии в инкубационный период (в первые же дни после заражения);
• Автоматизация процесса, что позволяет исключить погрешность исполнителя;
• Чувствительность к возбудителям (даже при минимальном присутствии антигена в крови);
• Точная информация о стадии патологии и эффективности выбранной методики лечения;
• Безболезненность процедуры;
• Быстрота получения результатов.

Однако, при проведении ифа-теста невозможно конкретизировать возбудителя заболевания – то есть, врач заранее должен иметь предварительный диагноз и четко знать, что ищет. Назначать тест с намерением просто угадать диагноз – нет смысла, анализ покажет иммунный ответ организма на присутствие возбудителя, но не укажет его конкретный вид.

При проведении ифа-теста возможен ложноположительный результат, но возникает он в редких случаях. Ложные показатели могут быть связаны с состоянием пациента (беременность), одновременным присутствием нескольких хронических заболеваний, приемом в период исследования некоторых лекарственных препаратов или серьезными нарушениями обменных процессов в организме пациента.

ИФА — крайне сложный и точный анализ, поэтому интерпретацией результатов должен заниматься только высококвалифицированный врач

Также к недостаткам ИФА-анализа относят высокую стоимость процедуры, что связано с достаточно дорогостоящим оборудованием, необходимым для его проведения, и необходимостью присутствия высококвалифицированных специалистов, занимающихся расшифровкой результатов.

Как делают анализ

Основным материалом для иммуноферментного анализа является сыворотка крови. У пациента берут кровь из вены, потом её подвергают центрифугированию, чтобы избавиться от лишних кровяных телец. Вместо венозной крови можно использовать околоплодные воды, мазки со слизистых оболочек и спинномозговую жидкость.

Особенности подготовки

Для того чтобы сохранить точность результата, анализ сдаётся натощак, а за две недели до его выполнения отменяют приём противовирусных и противомикробных препаратов. Такие меры принимаются, чтобы исключить влияние внешних факторов на результаты исследования.

Порядок взятия пробы

Условия получения биологического материала крайне важны для точности будущего результата. Довольно многое зависит от техники забора крови и стерильности инструментов. Как правило, взятие кровяной сыворотки осуществляют так, чтобы проникновение иглы в окружающие вену ткани произошло в один прокол. Кровь должна стекать по стенке пробирки равномерно, чтобы входящие в её состав эритроциты не разрушились в процессе анализа.

Когда проводят исследование крови, и когда будет результат

Для того чтобы иммуноферментный анализ дал точный ответ, исследование проводят натощак утром. Временной промежуток, в который можно получить результат, составляет от одного до трёх дней. Срок получения заключения может быть сокращён до нескольких часов при участии врача, который сможет сразу же расшифровать показатели. Сущность анализа сводится к получению определённых антител или антигенов.

Иммуноферментный анализ проводится по такой схеме. Сначала получают образец биологической жидкости (чаще всего – сыворотка крови). Для исследования используют пластиковые планшеты с лунками, в которые помещены очищенные антигены интересующего возбудителя, если целью анализа является определение антител, или антитела, если оценивают антигены. Полученный у пациента биоматериал вносится в заполненные лунки, затем наблюдают за реакцией. Если в крови обследуемого есть искомые соединения, образуется иммунный комплекс «антиген-антитело», если нет – ничего не произойдёт. Для визуализации химического процесса в лунку вводят красящее вещество, которое реагирует с объединённой молекулой, и это фиксируется путём инструментальной оценки оптической плотности.

Когда назначается иммуноферментный анализ крови

Существует множество показаний для проведения ИФА диагностики. Наиболее распространенными целями данного обследования являются:

1. Диагностика инфекционных заболеваний (вирусные гепатиты, ВИЧ, ЦМВ, ВЭБ, герпес, ветряная оспа, хеликобактер, заболевания передающиеся половым путем, токсоплазмоз, краснуха, корь и многие другие).
2. Отслеживание эффективности вакцинации (наиболее актуальным является оценка титра антител к столбняку у лиц, получивших травму, с целью решения вопроса о введении профилактической прививки и/или анатоксина).
3. Общая оценка показателей иммунитета, диагностика некоторых аутоиммунных патологий (системной красной волчанки, гломерулонефрита, тиреоидита).
4. Выявление некоторых онкомаркеров (ФНО, РЭА, ПСА).

Также с помощью иммуноферментного анализа определяется концентрация тестостерона, пролактина, прогестерона, ТТГ и других гормонов.

Особенности проведения исследования 

Материалом для исследования чаще всего служит сыворотка крови. Для этого в лаборатории берут венозную кровь. Для получения достоверного результата, забор биоматериала следует проводить утром натощак после 8-10 часового голодания. Это необходимо для того, чтобы кровь не свернулась, а плазма не стала мутной.

В дальнейшем из крови с помощью центрифугирования удаляются форменные элементы, затрудняющие диагностику (эритроциты, тромбоциты, лейкоциты), и проводят непосредственно ИФА анализ. При нем в полученный образец добавляется небольшое количество специфических антигенов. Полученная положительная реакция говорит о присутствии инфекции в организме или наличии иммунитета к ней.

Материалом для исследования также могут служить: ликвор, слезная жидкость отделяемое из глаз, урогенитальные и цервикальные мазки, околоплодные воды.

Срок выполнения анализа в среднем составляет 1-2 суток. При необходимости быстрого получения ответа в случае подозрении на некоторые опасные патологии, ИФА может быть выполнен в течении 2-3 часов.

Интерпретация анализа 

Расшифровкой полученных результатов, когда сдан иммуноферментный анализ крови, должен заниматься лечащий врач, оценивая их в комплексе с клинической картиной болезни и другими методами диагностики (общий и биохимический анализ крови, полимеразная цепная реакция и т. д.)

Результаты могут быть следующими:

• Положительный IgM говорит об остром течении инфекционного заболевания. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии болезни (организм не встречался с возбудителем), так и о хронизации процесса или выздоровлении. Также отрицательный результат может говорить об отсутствии иммунного ответа (у лиц с иммунодефицитными состояниями, после трансплантации органов и костного мозга, принимающих иммуносупрессию, химиотерапевтические препараты).
• Наличие IgA при отсутствии IgM обычно говорит о скрытой, бессимптомной инфекции. Либо о том, что с момента заражения прошло 1-2 суток и специфические антитела класса М не успели выработаться.
• Положительные результаты IgM и IgA одновременно — свидетельствует о разгаре острой фазы заболевания.
• Появление в крови IgG к инфекционному агенту говорит о переходе патологии в хроническую стадию, либо о выздоровлении и выработке естественного (а в случае вакцинации искусственного) иммунитета к патогену.

С целью уточнения диагноза при отрицательном или сомнительном результате первого анализа, при наличии явной клиники инфекционного процесса, повторить исследование рекомендуется спустя 14 суток, т. к. спустя данный промежуток времени в большинстве случаев организм успевает выработать достаточное количество антител.

Реклама партнеров

Как видят COVID-19 вирус в крови

• тип М говорит об остроте процесса, такие иммуноглобулины вырабатываются уже через неделю с начала болезни и фиксируются в кровотоке до месяца;
• тип G продуцируется спустя пару недель со дня инфицирования Ковидом и сохраняются в кровотоке до полугода, это они обеспечивают стойкий иммунитет;
• если в крови есть иммуноглобулины М и нет – G, это говорит, что заболевание не теряет остроту процесса, хотя началось более 2 недель или пациент в самом начале выздоровления. Отсутствие М при наличии G говорит, что пациент перенес коронавирусную инфекцию более месяца назад (до полугода).

При других инфекциях такие типы глобулинов обнаруживают после вакцинации.