Анализ на сальмонеллез: методы и лабораторная диагностика

Факторы патогенности шигелл

Важнейшее биологическое свойство шигелл, обусловливающее их патогенность, — способность внедряться в эпителиальные клетки, размножаться в них и вызывать их гибель. Этот эффект может быть обнаружен с помощью кератоконъюнктивальной пробы (введение под нижнее веко морской свинки одной петли культуры шигелл (2-3 млрд бактерий) вызывает развитие серозно-гнойного кератоконъюнктивита), а также путем заражения культур клеток (цитотоксическое действие) или куриных эмбрионов (их гибель), или интраназально белых мышей (развитие пневмонии). Основные факторы патогенности шигелл можно разбить на три группы:

• факторы, определяющие взаимодействие с эпителием слизистой оболочки;
• факторы, обеспечивающие устойчивость к гуморальным и клеточным механизмам защиты макроорганизма и способность шигелл размножаться в его клетках;
• способность продуцировать токсины и токсические продукты, которые обусловливают развитие собственно патологического процесса.

Первая группа включает в себя факторы адгезии и колонизации: их роль выполняют пили, белки наружной мембраны и ЛПС. Адгезии и колонизации способствуют ферменты, разрушающие слизь, — нейраминидаза, гиалуронидаза, муциназа. Вторая группа включает факторы инвазии, которые способствуют проникновению шигелл в энтероциты и их размножению в них и в макрофагах с одновременным проявлением цитотоксического и (или) энтеротоксического эффекта. Эти свойства контролируются генами плазмиды с м. м. 140 МД (она кодирует синтез белков наружной мембраны, обусловливающих инвазию) и хромосомными генами шигелл: кср А (обусловливает кератоконъюнктивит), cyt (отвечает за разрушение клеток), а также другими генами, еще не идентифицированными. Защита шигелл от фагоцитоза обеспечивается поверхностным К-антигеном, антигенами 3,4 и липополисахаридом. Кроме того, липид А эндотоксина шигелл обладает иммуносупрессивным действием: подавляет активность клеток иммунной памяти.

К третьей группе факторов патогенности относятся эндотоксин и обнаруженные у шигелл два типа экзотоксинов — экзотоксины Шига и шигаподобные (SLT-I и SLT-II), цитотоксические свойства которых наиболее сильно выражены у S. dysenteriael. Шига- и шигаподобные токсины обнаружены и у других серотипов S. dysenteriae, их образуют также S.flexneri, S. sonnei, S. boydii, EHEC и некоторые сальмонеллы. Синтез этих токсинов контролируется tox-генами конвертирующих фагов. Энтеротоксины типа LT обнаружены у шигелл Флекснера, Зонне и Бойда. Синтез LT у них контролируется плазмидными генами. Энтеротоксин стимулирует активность аденилатциклазы и отвечает за развитие диареи. Токсин Шига, или неиротоксин, не реагирует с аденилатциклазной системой, а оказывает прямое цитотоксическое действие. Токсины Шига и шигаподобные (SLT-I и SLT-II) имеют м.м. 70 кД и состоят из субъединиц А и В (последние из 5 одинаковых малых субъединиц). Рецептором для токсинов служит гликолипид мембраны клетки. Вирулентность шигелл Зонне зависит также от плазмиды с м. м. 120 МД. Она контролирует синтез около 40 полипептидов наружной мембраны, семь из них связаны с вирулентностью. Шигеллы Зонне, имеющие эту плазмиду, образуют колонии I фазы и обладают вирулентностью. Культуры, утратившие плазмиду, образуют колонии II фазы и лишены вирулентности. Плазмиды см. м. 120-140 МД обнаружены у шигелл Флекснера и Бойда. Липополисахарид шигелл является сильным эндотоксином.

[], [], [], [], [], [], [], [], [], [], []

Антигенная структура сальмонелл

Бактерии
рода сальмонелл имеют сложную антигенную
структуру. Подавляюшее большинство
серотипов сальмонелл имеют два вида
антигенов: термо­стабильный
О-антиген (соматический), связанный с
телом бактерий и термола­бильный
Н-антиген (жгутиковый), связанный с
двигательным аппаратом бакте­рий
Оба антигена имеют сложную структуру.
Так О-антиген состоит из двух и более
рецепторов, обозначаемых арабскими
цифрами. Жгутиковый антиген подразделен
на две фазы: 1-ю специфическую и 2-ю
неспецифическую фазы. Антигены
1-й специфической фазы условно обозначаются
малыми буквами латинского алфавита, а
2-й неспецифической—арабскими цифрами
и частично малыми буквами латинского
алфавита. У некоторых сальмонелл
Н-антиген от­сутствует полностью (S.
Pullorum,
S.
Gallinarum),
у других же отсутствует толь­ко
неспецифическая фаза или специфическая
фаза Н-антигена. О преимущест­венной
активности той или иной фазы антигена
можно косвенно судить по внешнему
виду колоний на МПА. Если колонии гладкие,
блестящие, с ровными краями,
то более активной является специфическая
фаза Н-антигена. Если ко­лонии
шероховатые, матовые, с неровными краями,
то более активна неспеци­фическая
фаза Н-антигена.

Эпидемиология брюшного тифа и паратифов

Источником брюшного тифа и паратифа А является только человек, больной или бактерионоситель. Источником паратифа В, кроме человека, могут быть и животные, в том числе птицы. Механизм заражения – фекально-оральный. Заражающая доза S. typhi 105 клеток (вызывает заболевание 50 % добровольцев), заражающие дозы сальмонелл паратифов А и В значительно выше. Заражение происходит главным образом в результате прямого или непрямого контакта, а также через воду или пищу, особенно молоко. Наиболее крупные эпидемии вызывало инфицирование возбудителями водопроводной воды (водные эпидемии).

Лечебные мероприятия

Лечение заболеваний, вызванных сальмонеллами этиотропное. До начала антибиотикотерапии больному необходимо промыть желудок и очистить кишечник. Для этого с помощью зонда и воронки вливают как минимум два литра воды, а затем ставят очищающую клизму. Всех больных с тяжелым гастроэнтеритом сальмонеллезной этиологии госпитализируют в инфекционное отделение стационара. Обязательной госпитализации подлежат лица из группы риска. Легкие формы патологии можно лечить дома, если состояние больного остается удовлетворительным.

Выздоровевшие лица долгое время остаются носителями инфекции и представляют определенную опасность для окружающих. После активной антибиотикотерапии нередко возникает дисбиоз кишечника, который требует длительного лечения синбиотиками.

Эпидемиология брюшного тифа и паратифов

Источником брюшного тифа и паратифа А является только человек, больной или бактерионоситель. Источником паратифа В, кроме человека, могут быть и животные, в том числе птицы. Механизм заражения — фекально-оральный. Заражающая доза S. typhi 105 клеток (вызывает заболевание 50 % добровольцев), заражающие дозы сальмонелл паратифов А и В значительно выше. Заражение происходит главным образом в результате прямого или непрямого контакта, а также через воду или пищу, особенно молоко. Наиболее крупные эпидемии вызывало инфицирование возбудителями водопроводной воды (водные эпидемии).

Эпидемиология

Источником инфекции при Сальмонеллёзе являются различные животные: рогатый скот, свиньи, лошади, собаки, кошки, грызуны (крысы и мыши), домашние птицы, особенно водоплавающие (утки, гуси); возможно также заражение от человека — больного и носителя сальмонелл. Значение тех или иных животных как источников инфекции не одинаково. Известно, что почти половина всех заболеваний человека С. связана с употреблением мяса крупного рогатого скота, а также свиней и лошадей. Инфицирование мяса может быть как прижизненным, так и постмортальным (после забоя животных). Прижизненное заражение связано с заболеванием животного С., протекающим нередко в форме септикопиемии. У животных возбудитель проникает в кровь из кишечника при сильном утомлении и неполноценном питании, что наблюдается во время их длительных перевозок или перегонов на мясокомбинаты и бойни. Бактерии, проникшие в мышцы утомленных животных, при отдыхе последних отмирают, и на третьи сутки большинство животных обычно освобождается от них. Мясо здоровых животных обладает бактерицидными свойствами, тогда как у утомленных животных оно бактерицидными свойствами не обладает. В эпидемиологии С

немаловажное значение имеет тот факт, что заболевание животного С. нередко приводит к вынужденному убою его вне бойни и реализации мяса без должного санитарного контроля.

Постмортальное заражение мяса может произойти в процессе убоя и разделки туш, при хранении, транспортировке и последующей кулинарной обработке. К этому приводит разделка туш больных и здоровых животных одним и тем же инструментом, возможное нарушение целости кишечника; заражение мяса грызунами при его хранении.

Роль собак и кошек как источников инфекции, по-видимому, ограничена, хотя эти животные и могут быть носителями сальмонелл. Грызуны, к-рые болеют С. и при этом в течение нескольких месяцев выделяют сальмонеллы с фекалиями и мочой, инфицируют продукты на складах и объектах общественного питания. Большинство исследователей все же отводит грузынам ограниченное место в распространении С.

Данные распространенности С. среди птиц достаточно обширны. Известно, что яйца птиц, в первую очередь водоплавающих, часто бывают заражены сальмонеллами. Заражение тушек птиц может произойти при разделке больной и здоровой птицы одним инструментом, при неправильной их кулинарной обработке.

О человеке как источнике инфекции при С. имеются разноречивые суждения. Одни исследователи считают больного человека и носителя сальмонелл опасным в эпидемическом отношении. Другие утверждают, что человек в эпидемиологии С. существенной роли не играет. Описанные в литературе контактные внутрибольничные вспышки С., при к-рых заражение происходило от вновь поступающих больных детей, подтверждают эпидемическую значимость человека как источника инфекции.

Факторами передачи С. являются разнообразные продукты, но преимущественно мясо и мясные продукты, молоко и молочные продукты, кондитерские изделия, изготовляемые с использованием молока, меланжей и яичного порошка. Реже возбудитель передается через рыбные продукты и овощи. Вода как путь передачи сальмонелл, по-видимому, не имеет существенного значения. Большинство заболеваний связано с использованием продуктов, зараженных при хранении и кулинарной обработке. В этих случаях наибольшую опасность представляют мясной фарш, паштеты, вареные колбасы, студни, молоко. Заболевания С. людей нередко связаны также с потреблением прижизненно зараженного мяса и яиц водоплавающей птицы. Имеются сведения об обнаружении сальмонелл в пыли больничных палат, что позволяет предполагать возможность передачи инфекции воздушно-пылевым путем.

С. может возникать как внутрибольничная инфекция (см.) в детских стационарах и родовспомогательных учреждениях в результате грубых нарушений персоналом санитарно-профилактического и противоэпидемического режима. При внутрибольничных вспышках чаще заболевают дети первого года жизни.

К С. одинаково восприимчивы взрослые и дети. С. распространен повсеместно. В городах встречается чаще, чем в сельской местности. Заметного преобладания заболеваний С. среди людей определенных профессий не наблюдается.

§ 5. Род proteus

Типовой вид P. vulgaris.

Протей впервые был выделен Хаузером в 1885 г. Это грамм» палочки. В мазках располагаются парно или цепочками, спор и капсул не образуют, подвижны. Капсул не имеют, факультативные анаэробы. Хорошо растет на обычных питательных средах. На МПА образует два вида колоний: в Н-форме колонии имеют вид «роения». Это типичная форма роста (сплошной рост), которая сопровождается неприятным гнилостным запахом. При неблагоприятных условиях (наличие в среде фенола, желчных солей) образует О-формы колоний, с ровными краями. Пигментов не образуют. При росте на жидких средах дают равномерное помутнение.

Антигенная структура. У протеев выделяют О-, Н- и К-антигены. Соматический О-антиген термостабилен, Н-ан-тиген — термолабилен. Род Proteus состоит из 5 видов, Pr. vulgaris, Pr. mirabilis, Pr. morgani (66 сероваров), Pr. rettgeri (45 сероваров), Pr. inconstans (156 сероваров). Некоторые из них относят к патогенным бактериям, хотя протей считается условно-патогенным микроорганизмом.

Резистентность. Во внешней среде протеи довольно устойчивы. При 60°С сохраняются около часа. Низкие температуры переносят хорошо. Устойчивы к действию дезраство-ров.

Патогенез поражений. Важным фактором патогенности протея является способность к образованию уреазы. Бактерии разлагают мочевину в качестве источника энергии, конечные продукты метаболизма (хлорид аммония) вызывают местное воспаление и способствуют образованию камней и застою мочи.

«Роящиеся» бактерии способны к адгезии и паренхиме почечной ткани и эпителию мочевого пузыря. Эти бактерии характеризуются повышенным образованием уреазы и гемолизинов. На кровяном агаре гемолитическая активность проявляется через 48 часов.

При снижении защитных сил организма протеи вызывают у человека циститы, энтероколиты, воспаление среднего уха, сепсис, послеоперационное нагноение ран и т. д.

Иммунитет после перенесенных заболеваний непродолжительный.

Лабораторные методы диагностики такие же, как и при других кишечных инфекциях. Идентификация протеев самая простая во всем семействе Enterobacteriaceae. Их легко распознать по способности давать вид «роения» и по гнилостному запаху.

Профилактика протейных заболеваний сводится к соблюдению санитарно-гигиенических правил: защита воды и продуктов питания от загрязнения испражнениями и гнойными выделениями.

Диагностика

Не смотря на то, что основой диагностики сальмонеллеза является микробиологическое исследование, для постановки диагноза необходим тщательный сбор анамнеза и осмотр больного.

Микробиологическое исследование сальмонеллеза заключается в выделении возбудителя из биоматериала больного. Кал, рвотные массы, желчь, промывные воды желудка засевают на среды для первичной идентификации — Эндо, Плоскирева, ВСА. Поскольку сальмонелла является абсолютным патогеном, нет смысла совершать количественный посев. Достаточно выяснить, присутствует бактерия в исследуемом образце или нет.

Чашки с посевами инкубируют при 37 градусах сутки, а затем изучают характер роста. Подозрительные лактозонегативные колонии отбирают, микроскопируют и пересевают на полиуглеводную среду Клиглера. Выделяют чистую культуру для изучения биохимических и антигенных свойств бактерий. Для получения ферментативной активности микробов используют среды цветного ряда. После накопления выделенной чистой культуры ее агглютинируют на стекле с сальмонеллезными сыворотками разных групп. После окончательной идентификации сальмонеллы определяют ее чувствительность к антибиотикам и бактериофагам.

Диагностика брюшного тифа и паратифов серологическая. Она заключается в постановке реакции агглютинации или реакция связывания комплемента. В крови определяют титр антител к возбудителю.

Общий и биохимический анализ крови имеет второстепенное значение. В гемограмме определяют признаки воспаления и состояния внутренних органов, степень дегидратации, гематокрит, вязкость крови, КОС.

Резистентность возбудителей брюшного тифа и паратифов

Возбудители брюшного тифа и паратифов во внешней среде (вода, почва, пыль) сохраняются, в зависимости от условий, от нескольких дней до нескольких месяцев. В проточной воде могут выживать до 10 дней, в застойной – до 4 нед., на овощах и фруктах – 5-10 дней, на посуде – до 2 нед., в масле, сыре – до 3 мес, во льду – до 3 мес. и больше; нагревание при температуре 60 °С убивает через 30 мин, а кипячение – мгновенно. Обычные химические дезинфектанты убивают их через несколько минут. Содержание в водопроводной воде активного хлора в дозе 0,5-1,0 мг/л или озонирование воды обеспечивают ее надежное обеззараживание как от сальмонелл, так и от других патогенных кишечных бактерий.

Какие анализы сдают на сальмонеллез

Анализ на сальмонеллез. При подозрении на сальмонеллез больной сдает анализы, подтверждающие диагноз. Для анализа берут кал больного и пробы пищи. Из обязательных лабораторных анализов назначают биохимический анализ крови- почечные и печеночные пробы, уровень амилазы, глюкозы, электролиты, коагулограмма.

Специфические исследования: выявление возбудителя бактериологическим методом посева на питательную среду Плоскирева. Также с диагностической целью применяется постановка реакции кольцепреципитации, проведение серологических реакций – РА и реакция непрямой гемагллютинации (РНГА), реакция иммунофлюорисценции (РИФ).

Для оценки тяжести состояния пациента необходимы:

• электрокардиография;
• ультразвуковое исследование органов брюшной полости;
• рентгенография легких.

Симптомы сальмонеллеза у взрослых, первые признаки

Первые признаки сальмонеллеза у человека могут проявиться уже через 6-7 часов после попадания бактерии в желудочно-кишечный тракт (период инкубации). При этом максимальный срок появления симптомов заболевания – 3 суток.

Человек почувствует общее недомогание на фоне высокой температуре в сочетании с другими интоксикационными признаками. Но на этой стадии симптомы сальмонеллеза у взрослых неспецифичны — в последующем заболевание может протекать в нескольких видах:

1) Гастроинтенстинальный вид – наиболее распространенная форма (93-95% случаев). Заболевание развивается быстро, и сразу же возникают следующие симптомы:

• резкое повышение температуры до 39 градусов, озноб и холодный пот;
• сильная слабость, ломота в костях;
• тошнота, рвота;
• частые позывы, жидкий стул;
• боли в области пупка.

Если говорить о легкой форме, то температура может не подниматься выше уровня субфебрильного показателя. Рвота одноразовая, жидкий стул наблюдается не более 3 дней и не чаще, чем 5 раз в сутки.

Для средней тяжести сальмонеллеза характерна температура 38-39 градусов, которая будет держаться не менее 4 суток. Рвота наблюдается постоянно, жидкий стул держится в течение недели, а количество позывов составляет 8-10 в день.

У пациента развивается сильное обезвоживание. Его признаками будут – сухость слизистых и кожи, постоянная жажда, снижение кожного тургора и т.д.

Кроме того, в процесс вовлекается и сердце – наблюдается тахикардия и падение артериального давления, особенно выраженное при инфекционно-токсическом шоке.

Тяжелая форма характеризуется такой же симптоматикой, как и средняя, но помимо сильной интоксикации, страдают внутренние системы организма. Это приводит к появлению таких изменений:

• увеличение в размерах печени и селезенки;
• аномалии работы почек;
• примесь слизи и крови в водянистом кале;
• тахикардия, гипотония;
• сухость кожи;
• судороги и цианоз.

В клиническом анализе крови виден подъем гемоглобина (сгущение крови на фоне обезвоживания) и лейкоцитоз, со сдвигом формулы влево. Пациент может потерять до 7-10% веса вследствие сильного обезвоживания.

Еще одна характерная особенность: сальмонелла не может давать схваткообразные боли (которые наблюдаются при диагностике дизентерии).

2) Тифоподобный вид – начало сальмонеллеза у взрослых схоже по симптомам с брюшным и паратифом. На почве интоксикации: рвоты, тошноты, жидкого стула, сильно повышается температура.

На 2-3-е сутки все признаки наличия в кишечнике сальмонеллы проходят, но лихорадка остается еще не менее, чем на 3-4 дня. У пациента наблюдаются осложнения со стороны кровеносной, нервной и выделительной систем, что проявляется следующими признаками:

• заторможенность реакций, апатичность пациента;
• бледность кожи, появление на лице и внизу живота герпетической сыпи на 5-6-й день;
• рассеянные хрипы при прослушивании легких;
• брадикардия, сердечная недостаточность, падение артериального давления;
• вздутие живота;
• увеличение в размерах селезенки и печени.

Тифоподобная форма не должна быть перепутана с одним из разновидностей тифозных заболеваний. Рецидивы сальмонеллеза этой формы отсутствуют, у пациента вырабатывается стойкий иммунитет к сальмонелле.

3) Септический вид – наиболее тяжелый вариант генерализованной формы. Первые 2-3 дня сальмонеллез проявляется, как и при тифоподобной форме, но затем симптоматика видоизменяется:

• вместо улучшения пациент испытывает усугубление своего состояния;
• наблюдаются температурные скачки с 35.8 до 39.5 градусов в течение суток по 4-5 раз;
• появляются вторичные гнойные очаги в виде остеомиелитов и артритов.

Гнойные воспаления существенно затрудняют диагностику заболевания и делают организм нечувствительным к стандартной антибактериальной терапии. Возможны осложнения в виде аортита, тонзиллита, аневризмы, холецистита, лимфаденита, менингита, мастоидита, абсцесса печени и т.д.

4) Бактерионосительный вид – форма болезни характеризуется отсутствием клинических симптомов сальмонеллеза, но при этом в бактериологических клинических исследованиях крови и кала выявляется сальмонелла:

• Острая форма – выделение сальмонелл в период от 2 недель до 3 месяцев у реконвалесцентов после манифестных форм.
• Хроническая форма – выделение бактерий дольше, чем 3 месяца.
• Транзиторная форма – выделение сальмонелл в условиях, когда клинические исследования показывали положительный результат всего 2-3 раза среди остальных негативных показаний в течение 3 месяцев.

5) Субклинический вид – сальмонеллез, признаки которого определяются на уровне минимальной выраженности. Диагностика возможна только методом выделения бактерий из кала пациента.

Профилактика

Мероприятия, позволяющие предупредить развитие сальмонеллеза:

• Контроль во всех звеньях пищевой цепи,
• Исключение контактов между маленькими детьми и питомцами-потенциальными носителями Salmonella,
• Употребление только пастеризованного молока и кипяченой или бутилированной воды,
• Тщательное мытье рук с использованием мыла,
• Гигиеническая и термическая обработка пищи,
• Обследование работников детских учреждений и пищевых предприятий,
• Укрепление иммунитета,
• Лечение хронических заболеваний, делающих организм человека уязвимым перед инфекцией,
• Изоляция и наблюдение за больными и бактерионосителями.

Salmonella — патогенные бактерии, являющиеся возбудителями высококонтагиозных инфекционных заболеваний: сальмонеллеза, брюшного тифа и паратифов. Чтобы предупредить эти достаточно распространенные патологии, необходимо соблюдать простые санитарно-гигиенические и противоэпидемические правила. Сальмонеллез хорошо поддается лечению. При своевременном обращении за медицинской помощью прогноз на выздоровление благоприятный.

Профилактика

Мероприятия, позволяющие предупредить развитие сальмонеллеза:

• Контроль во всех звеньях пищевой цепи,
• Исключение контактов между маленькими детьми и питомцами-потенциальными носителями Salmonella,
• Употребление только пастеризованного молока и кипяченой или бутилированной воды,
• Тщательное мытье рук с использованием мыла,
• Гигиеническая и термическая обработка пищи,
• Обследование работников детских учреждений и пищевых предприятий,
• Укрепление иммунитета,
• Лечение хронических заболеваний, делающих организм человека уязвимым перед инфекцией,
• Изоляция и наблюдение за больными и бактерионосителями.

Salmonella — патогенные бактерии, являющиеся возбудителями высококонтагиозных инфекционных заболеваний: сальмонеллеза, брюшного тифа и паратифов. Чтобы предупредить эти достаточно распространенные патологии, необходимо соблюдать простые санитарно-гигиенические и противоэпидемические правила. Сальмонеллез хорошо поддается лечению. При своевременном обращении за медицинской помощью прогноз на выздоровление благоприятный.

Лечение сальмонеллеза

Патогенетическая терапия сальмонеллеза

1. Дезинтоксикация;
2. Нормализация водно-солевого обмена;
3. Купирование ацидоза, гипоксии;
4. Нормализация гемодинамики, функции сердечно-сосудистой системы и почек.

Основные назначения

1. Сразу при поступлении назначается промывание желудка.
2. Купирование диареи: лоперамид и инфузионное введение препаратов кальция.
3. Нестероидные противовоспалительные средства;
4. Внутривенные инфузии глюкозо-солевых растворов;
5. После купирования тошноты и рвоты – обильное питье;
6. Антибактериальная терапия антибиотиками;
7. Сальмонеллезный бактериофаг.

Серологическая типизация сальмонелл

По
серологической типизации насчитывается
более 2000 серотипов сальмо­-нелл.
Они обитают в организме животных многих
видов и человека, а также вовнешней
среде.

Вместе
с общностью морфологических и культуральных
свойств бактерии рода
сальмонелла отличаются друг от друга
по антигенным свойствам. Эти раз­личия
и положены в основу метода их серологической
типизации.

По
различию в строении О-антигенов у
отдельных видов сальмонелл Кауф­ман
и Уайт разделили бактерии этого рода
на несколько серологических групп,
которые
обозначаются заглавными буквами
латинского алфавита иногда в со­четании
с арабскими цифрами—А, В, С, Б, Е и т. д.
Все сальмонеллы, отно­сящиеся
к одной группе, имеют один или несколько
общих рецепторов О-антигена.
Поэтому серологическая типизация
сальмонелл осуществляется в два этапа.
Вначале по наличию определенного
рецептора О-антигена определяют группу,
затем внутри группы по наличию определенных
Н-антигенов опреде­ляют
серотип сальмонеллы.

Серологическая
типизация осуществляется при помощи
реакции агглютина­ции
на стекле с сальмонеллезными сыворотками.
Для
реализации этой методики отечественные
биофабрики выпускают два
набора
диагностических сывороток: комплексные
сальмонеллезные агглютини­рующие
сыворотки на О-антиген и монорецепторные
сальмонеллезные агглю­тинирующие
сыворотки на Н и О-антиген. Первый
набор состоит из 8 комплексных
сальмонеллезных агглютинирующих
сывороток
на О-антиген. Каждая из этих сывороток
реагирует с 8 различными
рецепторами
О-антигена (см. табл.7).

Для
определения группы бактерий ставят
реакцию агглютинации со всеми восемью
сыворотками. Первая сыворотка является
контрольной и реагирует с любой
сальмонеллой, входящей в одну из основных
групп, для диагностики которых
предназначен данный набор. При учете
реакции определяют, в какой из
оставшихся семи сывороток наблюдается
положительная реакция аналогич­ная
контрольной сыворотке. После этого,
смотрят по табл. 3, какой из рецепто­ров
в прореагировавшей сыворотке стоит на
первом месте. Далее по табл. 4 определяют,
в какой группе сальмонелл встречается
данный рецептор.

После
определения группы сальмонеллы,
определяют ее серотип. Для этого выявляют,
какие Н(0)-антигены характерны для данной
группы (см. табл.), и подбирают
к ним монорецепторные агглютинирующие
сыворотки из второго набора.
Затем ставят с этими сыворотками реакцию
агглютинации на стекле и по
тем сывороткам, которые показали
положительную реакцию, определяют
серотип
бактерий (см. табл. 8).

Таблица
7

Состав
О-комплексных агглютинирующих
сальмонелезных сывороток Таблица 7

Методика
постановки реакции агглютинации на
стекле

Для
постановки данной серологической
реакции используют свежую суточ­ную
культуру сальмонелл, выращенную на
скошенном МПА. Берут предмет­ные
стекла и наносят на них карандашом по
стеклу наименования используе­мых
диагностических сальмонеллезных
сывороток. При помощи пипетки по­мещают
каплю соответствующей агглютинирующей
сыворотки на подписан­ное
предметное стекло

Затем фламбируют
бактериологическую петлю, охлаж­дают
и отбирают маленький кусочек исследуемой
колонии микроорганизмов (для
реакции с О-антигеном берут колонии с
верхней части скоса, а для реакции с
Н-антигеном берут колонии с нижней части
скоса, где более влажно и жгути­ки
у бактерий лучше сохраняются), переносят
ее в каплю сыворотки на пред­метном
стекле и осторожно перемешивают. Учет
реакции проводят через 5-10
На темном фоне просматривают капли
сыворотки

В случае положитель­ной
реакции капля сыворотки просветляется
и в ней образуются отчетливые белые
глыбки.

В
настоящее время в России и за рубежом
для экспресс — диагностики и типизации
возбудителей сальмонеллеза и других
пищевых токсикоинфекции используют
также

РНГА
и др. серологические реакции и
диагностикумы.

Таблица
8

Антигенные
свойства разных серотипов сальмонелл

Серовары

С. enterica подвид. enterica содержит большое количество серотипов , которые могут заражать широкий круг позвоночных хозяев. Отдельные члены варьируются от высокой степени хозяин адаптированный (только способен инфицировать узкий диапазон видов) для отображения широкого круга хозяев. Ряд методов в настоящее время используются для дифференциации между серотипов . Они включают в себя , глядя на наличие или отсутствие антигенов , фаготипирование , молекулярную дактилоскопия и Биотипирование, где серовары дифференцированы , с помощью которого питательных веществ , они способны ферментировать. Одним из возможных факторов при определении хозяина диапазона конкретных сероваров являются фаг-опосредованного получением небольшого числа генетических элементов , которые позволяют инфекцию конкретного хозяина. Далее постулируется , что сероваров , которые заражают узкий диапазон видов отклонились от предков с широким кругом хозяев, и с тех пор специализированные и потеряли способность инфицировать некоторые хосты.

Выбор сероваров, с известными хостов в списке. Поскольку существует более 2500 сероваров сальмонелла энтерика подвида. enterica , этот список является неполным.

Изучение данных из 37 стран , собранных в период с 2001 по 2007 год показал , что наиболее распространенный серологический из Salmonella изолированы от человеческих случаев было Enteritidis, обнаружено в среднем 43,5% случаев, с последующим Typhimurium (17,1% случаев), Ньюпорт (3,5 %), Infantis (1,8%), Вирхова (1,5%), ХАДАР (1,5%), а Агон (0,8%).

В ноябре 2016 года, новый штамм с широкой лекарственной устойчивостью (ШЛУ) сальмонелла энтерика серовара Typhi возникла в Пакистане, в основном из городов Хайдарабад и Карачи . Устойчивые мультилекарственные штаммы присутствовали , так как в Африке и Азии в конце 1970 — х годов. Эти штаммы XDR устойчивы ко всем антибиотикам вариантов лечения: хлорамфеникол, ампициллин, триметоприм-сульфаметоксазол, фторхинолонов и цефалоспоринов третьего поколения. Вспышка продолжается с 2016 года.

Генетические данные свидетельствуют о том, что серовары можно разделить на две группы — одна, которая вызывает кишечную инфекцию и имеет широкий репертуар метаболических возможностей, и тот, который обычно вызывает инвазивной инфекции, часто в узком диапазоне хостов, и показывает деградацию анаэробных метаболических путей , Считаются, что эти метаболические возможности важны для получения питательных веществ в сложной и питательной ограниченном воспаленной среде кишечника.